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细胞复苏、传代和冻存


服务简介:

永生性的细胞可以无限制的生长,当生长一定数量之后,由于空间的限制和接触性抑制,细胞不再生长,甚至可能死亡,因此细胞需要减少密度,以至于细胞得以生长和存活。对于细胞保存,我们将细胞保存在液氮罐中,使用细胞时,需要将细胞复苏。


技术原理:

细胞复苏:从液氮中取出冻存管,于37℃水浴锅中至冰晶溶解,冻存管中的液体转移至离心管,离心后,弃上清,加入完全培养基吹打混匀后,转移至培养瓶,于培养箱内培养。

细胞传代:PBS清洗,胰蛋白酶消化,完全培养基终止消化,离心机离心,留1/3的细胞混合液转移至培养瓶内,于培养箱内培养

细胞冻存:重悬得到细胞液,取1.5ml重悬细胞液,加入10%细胞级DMSO,放入梯度冻存盒内,放置-80度冰箱,3天后,将冻存管移至液氮内。




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